Identifizierung der an der Epithelzelltransformation beteiligten Gene | |
| Kennziffer | 20.123.100p |
| Projektleiter/in |
Prof. Dr. Ralf Jacob
Telefon 06421 28-66482 |
| Weitere Bearbeiter/innen | Dr. Delphine Delacour |
| Kurzbeschreibung |
Im Rahmen der Analyse von Proteinkomponenten in apikalen Transportvesikeln epithelialer Zellen konnte Galectin-3 als einer der Hauptbestandteile identifiziert werden. Es ist bekannt, dass Galectin-3 mit verschiedenen zellulären Effekten in Zusammenhang steht, wie der Regulation der Apoptose, der Tumorentwicklung, der Zell-Adhäsion und dem sekretorischen Proteintransport. Die zugrunde liegenden Mechanismen sind hierbei jedoch unklar. Dieses Projekt soll zelluläre Mechanismen, in denen Galectin-3 involviert ist, sowie die molekularen Interaktionspartner dieses Zucker-bindenen Lectins aufklären. Geplant sind Studien über die Rolle von Galectin-3 im gerichteten apikalen Transport epithelialer Zellen im Vergleich mit Transportanalysen in Zellen, die diese Polarität verloren haben, was z.B. bei der Transformation zu Tumorzellen beobachtet wird. Als Modellsystem werden verschiedene epitheliale Zelllinien verwendet, wie die Hundenierenzelle MDCK (Madin Darby Canine Kidney) und die humanen intestinalen Tumorzellen HT-29 und Caco-2. Der Einfluss von Galectin-3 auf die Zellpolarität wird in diesen Zelllinien mit Hilfe der polar sortierten Modellproteine Lactase-Phlorizin-Hydrolase (LPH), Dipeptidyl-Peptidase IV (DPPIV) und Saccharase-Isomaltase (SI) studiert. Im Rahmen einer Kooperation mit Francoise Poirier (Institute Jacques Monod, CNRS, Paris) haben wir auch Zugang zu einer Galectin-3 knockout Maus, deren Epithelzellen in Primärkultur studiert werden können. Wechselwirkungen von Galectin-3 mit möglichen Interaktionspartnern sollen durch 2D-Gelaufreinigung gefolgt von der massenspektrometrischen Bestimmung einzelner Kandidatenproteine definiert werden. Bedingt durch die gezielte Aufreinigung von Galectin-3 Bindungspartnern aus apikalen Transportvesikeln sollen hier weitere Komponenten identifiziert werden, die gemeinsam mit Galectin-3 die apikale Zellpolarität steuern.
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| Laufzeit | 01.06.2004 - 31.05.2005 |
| Finanzierung | Alfred und Ursula Kulemann-Stiftung |
| Zugehörigkeit | Intra- und interzellulärer Transport und Kommunikation (DFG-GRK 1216) |
| Publikationen | Delacour,D., Cramm-Behrens,C.I., Drobecq,H., Le Bivic,A., Naim,H.Y., and Jacob,R. (2006). Requirement for galectin-3 in apical protein sorting. Curr. Biol. 16, 408-414 |
